Ub-AMC (泛素-7-氨基-4-甲基香豆素)

产品概述

Ub-AMC 是将泛素（Ubiquitin）C 末端通过异肽键与荧光报告基团 AMC（7-氨基-4-甲基香豆素）共价偶联的荧光底物，是去泛素化酶（Deubiquitinase, DUB）活性检测领域使用最广泛、引用量最高的经典工具试剂。

检测原理

完整的 Ub-AMC 分子中，AMC 的荧光被泛素部分有效淬灭。当 DUB 酶识别并切割泛素 C 末端的异肽键后，游离的 AMC 释放到溶液中，其荧光强度瞬间提升数百倍（Ex 360 nm / Em 460 nm），通过荧光读板机或荧光光谱仪可实时、定量监测酶反应进程。荧光信号的增加速率与 DUB 酶活性成正比。

应用场景

• DUB 酶动力学参数测定（Km、kcat、Vmax）
• DUB 抑制剂高通量筛选与 IC50 测定
• 细胞裂解液中总 DUB 活性定量
• DUB 酶促反应条件优化（pH、温度、离子强度）
• 泛素-蛋白酶体通路研究

产品优势

• HPLC 纯度 ≥95%，批间一致性优异
• 低背景、高信噪比，适合微量酶活检测
• 每批次均经质谱（MS）和 HPLC 双重确证
• 提供 1mg 和 5mg 规格，支持大批量定制

实验建议

推荐底物终浓度：0.5–5 μM（根据酶浓度调整）。反应缓冲液建议使用含 1 mM DTT 的 Tris-HCl (pH 7.4)。建议在反应起始时加入底物，连续监测荧光 30–60 分钟。