产品说明书
QW-001
Ub-AMC 是将泛素(Ubiquitin)C 末端通过异肽键与荧光报告基团 AMC(7-氨基-4-甲基香豆素)共价偶联的荧光底物,是去泛素化酶(Deubiquitinase, DUB)活性检测领域使用最广泛、引用量最高的经典工具试剂。
完整的 Ub-AMC 分子中,AMC 的荧光被泛素部分有效淬灭。当 DUB 酶识别并切割泛素 C 末端的异肽键后,游离的 AMC 释放到溶液中,其荧光强度瞬间提升数百倍(Ex 360 nm / Em 460 nm),通过荧光读板机或荧光光谱仪可实时、定量监测酶反应进程。荧光信号的增加速率与 DUB 酶活性成正比。
推荐底物终浓度:0.5–5 μM(根据酶浓度调整)。反应缓冲液建议使用含 1 mM DTT 的 Tris-HCl (pH 7.4)。建议在反应起始时加入底物,连续监测荧光 30–60 分钟。
| 货号 | QW-001 |
| 分子式 | C₃₈₈H₆₃₆N₁₀₆O₁₁₉S |
| 分子量 | 8,722 Da |
| 纯度 | ≥95% (HPLC) |
| 规格/包装 | 1mg / 5mg / 定制 |
| Ex | 360 nm |
| Em | 460 nm |
| 储存条件 | -80°C 避光保存 |
采用反相高效液相色谱-质谱联用(RP-HPLC-MS)对 Ub-AMC 进行分析,实测分子量为 8,721.7 Da,与理论计算值 8,722 Da 高度一致。

采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)对 Ub-AMC 进行纯度分析。色谱条件为:Welch® XB-C18 柱(4.6×250 mm, 5 μm),流速 1.0 mL/min,检测波长 214 nm。纯度≥95%。

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对 Ub-AMC 进行分子量及纯度验证。以下为考马斯亮蓝染色结果。

50 μg Ub-AMC 粉末溶解于 DMSO 后,以 50 mM Tris / 100 mM NaCl / 1 mM DTT / 1 mM EDTA(pH 7.5)缓冲液稀释至 287 μL(20 μmol/L)。取 200 μL 底物与 0.2 μL UCHL3(2.07 mg/mL)在 96 孔黑色酶标板中反应,Thermo Scientific Varioskan LUX 监测(Ex 360 nm / Em 460 nm)。
