产品说明书
QW-002
Ub-Rho110 是将泛素 C 末端与罗丹明 110(Rhodamine 110)共价偶联的高灵敏度荧光底物。相比经典底物 Ub-AMC,Rho110 具有显著更高的量子产率、更强的光稳定性和更长的激发波长,可有效避免生物样品中常见自发荧光干扰,是 DUB 抑制剂高通量筛选和低丰度酶活检测的理想选择。
完整的 Ub-Rho110 分子中,泛素分子占据罗丹明 110 的一个氨基位点,荧光被完全猝灭。DUB 切割后释放游离 Rho110,在 Ex 485 nm / Em 528 nm 处产生强荧光信号,检测窗口位于可见光区,兼容常规荧光读板机和显微镜。
推荐底物终浓度:0.1–1 μM。缓冲液:50 mM HEPES (pH 7.5),含 0.5 mM TCEP 和 0.1 mg/mL BSA。TCEP 比 DTT 更适合 Rho110 体系,可避免 DTT 引起的非特异性荧光。
| 货号 | QW-002 |
| 分子式 | C₄₀₀H₆₄₄N₁₀₈O₁₂₁S |
| 纯度 | ≥95% (HPLC) |
| 规格/包装 | 1mg / 5mg / 定制 |
| Ex | 485 nm |
| Em | 528 nm |
| 储存条件 | -80°C 避光保存 |
采用反相高效液相色谱-质谱联用(RP-HPLC-MS)对 Ub-Rho110 进行分析,实测分子量与理论计算值 8,933.9 Da 高度一致。

采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)对 Ub-Rho110 进行纯度分析。色谱条件为:Welch® XB-C18 柱(4.6×250 mm, 5 μm),流速 1.0 mL/min,检测波长 214 nm。纯度≥95%。

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对 Ub-Rho110 进行分子量及纯度验证。以下为考马斯亮蓝染色结果。

50 μg Ub-Rho110 粉末溶解于 DMSO 后,以 50 mM Tris / 100 mM NaCl / 1 mM DTT / 1 mM EDTA(pH 7.5)缓冲液稀释至 280 μL(20 μmol/L)。取 200 μL 底物与 0.2 μL UCHL3(2.07 mg/mL)在 96 孔黑色酶标板中反应,Thermo Scientific Varioskan LUX 监测(Ex 485 nm / Em 528 nm)。
