Ub-Rho110 (泛素-罗丹明110)

产品概述

Ub-Rho110 是将泛素 C 末端与罗丹明 110（Rhodamine 110）共价偶联的高灵敏度荧光底物。相比经典底物 Ub-AMC，Rho110 具有显著更高的量子产率、更强的光稳定性和更长的激发波长，可有效避免生物样品中常见自发荧光干扰，是 DUB 抑制剂高通量筛选和低丰度酶活检测的理想选择。

检测原理

完整的 Ub-Rho110 分子中，泛素分子占据罗丹明 110 的一个氨基位点，荧光被完全猝灭。DUB 切割后释放游离 Rho110，在 Ex 485 nm / Em 528 nm 处产生强荧光信号，检测窗口位于可见光区，兼容常规荧光读板机和显微镜。

应用场景

• DUB 抑制剂高通量筛选（HTS）与 SAR 研究
• 低浓度重组 DUB 酶活性检测（检测限低至 pM 级）
• 复杂生物基质（血清、细胞裂解液）中 DUB 活性测定
• 荧光偏振（FP）或荧光寿命（FLT）等高级检测模式
• 活细胞内 DUB 活性成像（需配套递送体系）

产品优势

• 量子产率约为 AMC 的 3–5 倍，信噪比显著提升
• Ex/Em 位于可见光区，减少紫外光对生物样品的损伤
• 极低的自发水解率，37°C 反应中背景稳定
• 提供标准品、研究级和优级纯三个等级

实验建议

推荐底物终浓度：0.1–1 μM。缓冲液：50 mM HEPES (pH 7.5)，含 0.5 mM TCEP 和 0.1 mg/mL BSA。TCEP 比 DTT 更适合 Rho110 体系，可避免 DTT 引起的非特异性荧光。